博雅辑因与魏文胜课题组联合公开新技术,增强CRISPR高通量筛选

近日 , 博雅辑因(EdiGene)与北大魏文胜课题组在Genome Biology杂志联合在线发表了题为“Guide RNAs with embedded barcodes boost CRISPR-pooled screens”的研究论文 , 公开了一种构建CRISPR文库的新方法——iBar技术 。 该方法为在体内或原代细胞系等细胞数量有限的情况下进行高通量基因组研究提供了重要工具 。

博雅辑因与魏文胜课题组联合公开新技术,增强CRISPR高通量筛选

----博雅辑因与魏文胜课题组联合公开新技术 , 增强CRISPR高通量筛选//----

(在线文章截图)

CRISPR/Cas9系统作为强大的基因组编辑工具被广泛运用于基因的功能性筛选研究 。 而CRISPR高通量基因组筛选技术 , 则是一种使用CRISPR/Cas9将某个细胞群体改造成同时拥有许多种基因突变的细胞库 , 然后利用药物、细胞因子等不同的环境条件对这个细胞库中不同基因型的细胞进行筛选 , 高通量地对大量的基因进行功能研究 。 为保证筛选准确性 , 需要尽可能避免“搭车效应” 。 即避免一个细胞中因同时出现多种基因突变而互相干扰对其功能的研究 。 目前通行的办法 , 是要求在慢病毒侵染构建文库时保证较低的感染复数(MOI);同时为获得高度可重复性的结果 , 需要多组实验重复 。 这些要求使常规筛选工作量巨大;同时当细胞来源受限时(如原代细胞、体内研究等) , 难以实现大规模的功能性筛选研究 。 而本次公布的iBar技术则刚好可以解决以上问题 。