CRISPR分子诊断技术的开发
麻省理工学院(MIT)和哈佛的Broad Institute的张峰团队正在努力开发CRISPR- Cas13分子诊断技术 。Cas13蛋白不像用于基因编辑的Cas9蛋白,它在切割靶序列后会不加选择地切割碰到的RNA(collateral cleavage);这一特性使其不能被用于基因编辑,但对诊断来说却是个福音,该切割能增加检测信号的灵敏度。2018年,他们把这种诊断技术命名为SHERLOCK(Specific High-Sensitivity Enzymatic Reporter UnLOKing),该系统包含Cas13、对应的靶向待检测病毒的sgRNA和包含一个切割后可发出荧光的报告RNA链;当这些Cas13蛋白识别到靶向RNA链时会切割相应的模板,随后激活了它的collateral cleavage活性,进而切割报告RNA并释放可检测的荧光信号(图1)。
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